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这一次《生化奇兵2》重新回归，并新增了多人在线对战功能。这样一来，玩家不仅可以单独享受深海之旅，还能与朋友在线同玩。《生化奇兵2》的在线模式中设有等级系统，玩家通过击败敌人、助攻、拍照、黑入炮塔或自动贩卖机等行为获得亚当（Adam），累积到一定数量的亚当后便可升级，并解锁新武器或能力。

除了提供额外经验值的试炼（类似于《决胜时刻》的“挑战”）不算在内，多人游戏中的解锁内容分为三类：武器（右手）、Plasmid（左手）和Gene Tonics（常驻效果）。每种武器都可以进行一次升级，以提高枪械的威力、射速或装弹量。武器、Plasmid和Gene Tonics的解锁等级和功能如下：

武器

手枪（Pistol）为初始武器

等级5：连发模式（Automatic Firing Mode），手枪可以全自动射击，但会降低整体射速。

等级27：威力提升（Damage Upgrade），增加手枪的威力，但会降低射速。

霰弹枪（Shotgun）为初始武器

等级9：射速提升（Higher Rate of Fire），增加霰弹枪的射速，但会缩短射程。

等级29：自动装填（Auto-Reload），射击后能自动装填，但会降低射速。

机枪（Tommy Gun）在等级2时解锁

等级13：弹匣容量提升33%（33% Clip Increase），机枪的弹匣从30发提升至40发。

等级31：减少后座力（Recoil Decrease），提高机枪射击时的稳定性，但降低了射击速度。

榴弹发射器（Grenade Launcher）在等级6时解锁。

等级17：热追踪火箭（Heat-Seeking RPGs），将榴弹发射器的破片榴弹转换为热追踪火箭，能够自动锁定最靠近准星的目标。火箭的爆炸范围小于榴弹。

等级33：提高弹道速度（Velocity Boost），显著提升榴弹的飞行速度。

十字弓（Crossbow）在等级10时解锁。

等级21：提升威力（Damage Boost）：增加十字弓的攻击力，但显著降低射击速度。

等级35：提高射速（Rate of Fire Boost），提升十字弓的射击速度，但显著降低其威力。

钉枪（Nail Gun）在等级14时解锁。

等级23：扩展弹匣（Extended Magazine），增加弹匣容量。

等级37：提升威力（Damage Increase），增强钉枪的杀伤力，但会减少其精准度。

猎象枪（Elephant Gun）在18级时解锁。

等级25：狙击镜（Sniper Scope），在武器上加装瞄准镜，提高远距离的精准度，但会显著影响近距离的视野。

等级39：提升威力（Damage Increase），增强猎象枪的杀伤力，但会降低其射速。

Plasmid

Incinerate：自动获得

火焰攻击，能够对敌人造成持续的火焰伤害，并可点燃油池或其他易燃物。蓄力可增加威力和范围。可用来融化冰。

Winter Blast：自动获得

冷冻攻击，可以对敌人造成冰冻伤害，并减缓他们的移动和攻击速度。玩家可以通过肉搏攻击或使用Aero Dash粉碎冰冻的敌人。蓄力可增强减速效果。可用于灭火。

Electro Bolt：自动获得

闪电攻击能够暂时削弱敌人的移动和武器攻击能力（敌人仍然可以使用细胞体Plasmid进行攻击）。射击水洼可以引起强大的范围导电效果。蓄力可以增加攻击威力和瘫痪时间。

Aero Dash：在等级4时解锁

快速向当前方向冲刺，并撞倒路径上的敌人。冲撞被冻结的敌人会将其粉碎。

Geyser Trap：在等级8时解锁

在地面上设置一个陷阱，将敌人（或使用者自己）向上弹飞。Geyser Trap可以与Electro Bolt和Winter Blast结合使用，先放置Geyser Trap，然后对准它使用Electro Bolt或Winter Blast，就能制造出瘫痪或冻结敌人的陷阱。

Telekinesis：在等级12时解锁

使用念动力移动物体，效果与单人模式相同。

Houdini Plasmid：在等级16时解锁

使玩家隐身，一旦进行攻击或使用Plasmid就会显形。隐身状态下会持续消耗EVE。

Insect Swarm：在等级20时解锁

对敌人进行持续的伤害，并干扰他们的视线。

基因调节剂

3级

研究大师：提升研究敌人尸体（通过拍照）速度。

安全规避：降低敌方机枪或炮塔攻击玩家时的命中率。

7级

快速恢复：提高生命值恢复的速度。

EVE节省器：减少使用Plasmid时EVE的消耗。

11级

背后刺客：从背后用近战武器攻击敌人时，造成额外伤害。

级别15

新陈代谢EVE

级别19

破坏行动

级别22

修理工

级别24

快速黑客

级别26

重击者

等级28

提升优势

等级30

快速移动

等级32

致命机器

等级34

头部猎手：提高攻击敌人头部时的伤害输出。

等级36

大型猎物猎手

等级38

死亡陷阱

等级40

复活：当你被击倒时，你会以非常低的生命值重新站起来一次。